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技術(shù)文章

免疫組織染色注意事項(xiàng)點(diǎn)擊次數(shù):1892 更新時間:2016-09-02

免疫組織染色注意事項(xiàng),1、概念和基本原理

 

免疫組織化學(xué)又稱免疫細(xì)胞化學(xué),是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng),對相應(yīng)抗原進(jìn)行定位、定性、半定量測定的一項(xiàng)新技術(shù)。它把免疫反應(yīng)的特異性和組織化學(xué)的可見性巧妙地結(jié)合起來,借助顯微鏡的現(xiàn)像和放大作用,在細(xì)胞、亞細(xì)胞水平檢測各種抗原物質(zhì),并可在原位顯示相應(yīng)的基因和基因表達(dá)產(chǎn)物。免疫組織化學(xué)方法種類現(xiàn)已有:免疫熒光組織(細(xì)胞)化學(xué)技術(shù)、免疫酶組織(細(xì)胞)化學(xué)技術(shù)、親和組織化學(xué)技術(shù)、免疫金銀及鐵標(biāo)記免疫組織化學(xué)技術(shù)等。

 

免疫熒光組織(細(xì)胞)化學(xué)技術(shù)是采用熒光素標(biāo)記的已知抗體(或抗原)作為探針,檢測待測組織、細(xì)胞標(biāo)本中的靶抗原(或抗體),形成的抗原抗體復(fù)合物上帶有熒光素,在熒光顯微鏡下,由于受高壓汞燈光源的紫外光照射,熒光素發(fā)出明亮的熒光,這樣就可以分辨出抗原(或抗體)的所在位置及其性質(zhì),并可利用熒光定量技術(shù)計(jì)算抗原的含量,以達(dá)到對抗原物質(zhì)定位、定性、半定量測定的目的。

 

免疫組織染色注意事項(xiàng),2、標(biāo)本制作

 

免疫熒光一般用冰凍切片,減少雜質(zhì)干擾;而酶免疫組化一般用石蠟切片或冰凍切片均可以。

 

免疫組織染色注意事項(xiàng),3、實(shí)驗(yàn)步驟

 

免疫熒光染色步驟簡單,而酶免疫組化方法較為復(fù)雜,多了DAB顯色過程、脫水等步驟。

 

,4、染色后的標(biāo)本保存

 

免疫熒光染色后的標(biāo)本一般短時間拍照,時間長了熒光衰退,建議不要長期保存;而酶免疫組化染色切片經(jīng)過脫水、透明和封片等可以長期保存。

 

 

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