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技術(shù)文章

細(xì)胞分離技術(shù)點(diǎn)擊次數(shù):1476 更新時間:2016-09-21

  離心是研究如細(xì)胞核、線粒體、高爾基體、溶酶體和微體,以及各種大分 子基本手段。一般認(rèn)為,轉(zhuǎn)速為10~25Kr/min的離心機(jī)稱為高速離心機(jī);轉(zhuǎn)速超過25Kr/min,離心力大于89Kg者稱為超速離心機(jī)。目前超速 離心機(jī)的zui高轉(zhuǎn)速可達(dá)100Kr/min,離心力超過500Kg。

    在密度均一的介質(zhì)中由低速到高速逐級離心,用于分離不同大小的細(xì)胞和細(xì)胞器。在差速離心中細(xì)胞器沉降的順序依次為:核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體、zui后為核蛋白體。

    由于各種細(xì)胞器在大小和密度上相互重疊,而且某些慢沉降顆粒常常被快沉降顆粒裹到沉淀塊中,一般重復(fù)2~3次效果會好一些。

    差速離心只用于分離大小懸殊的細(xì)胞,更多用于分離細(xì)胞器。通過差速離心可將細(xì)胞器初步分離,常需進(jìn)一步通過密度梯離心再行分離純化。

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