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技術(shù)文章

組織細(xì)胞內(nèi)抗原的固定性點(diǎn)擊次數(shù):1677 更新時(shí)間:2017-04-13

  組織細(xì)胞內(nèi)抗原的固定是免疫酶標(biāo)和非標(biāo)記免疫酶組織化學(xué)方法中的重要環(huán)節(jié)。經(jīng)過(guò)固定,可以達(dá)到如下目的:1.標(biāo)本在玻片上的吸著力增加;2.標(biāo)本所含的類(lèi)脂和蠟質(zhì)等成分可以除去,從而有利于抗原與酶標(biāo)記抗體的結(jié)合;3.標(biāo)本的保存時(shí)間可以增長(zhǎng),組織切片固定后,在-20,可以存放一年以上而不改變免疫酶技術(shù)的染色;組織內(nèi)有關(guān)抗原不同,則所用固定劑與固定方法也隨之改變。

   丙酮和乙醇是常用的兩種固定劑。但對(duì)于許多病毒與細(xì)菌的定位研究,選擇丙酮和四氯化化碳作為固定劑是zui合適的;對(duì)于可溶性蛋白抗原的定位,常用乙醇;對(duì)于多糖,則用8%10%福爾馬林,而不用乙醇與丙酮等有機(jī)溶劑。

  對(duì)于植物病毒材料的固定,丙酮用得zui多,乙醇次之。因?yàn)楸獙?duì)病毒的抗原性損害為zui小,但對(duì)于那些不穩(wěn)定的病毒,則應(yīng)避免固定。

  在應(yīng)用免疫酶技術(shù)時(shí),固定處理對(duì)酶的活性的影響也得心中有數(shù)。許多固定劑對(duì)抗原的活性都 會(huì)有所損害,例如,福爾馬林對(duì)蛋白抗原的固定造成抗原性的破壞非常明顯。因此,對(duì)福爾馬林的使用必須嚴(yán)格控制濃度,一般使用的福爾馬林濃度為10%,盡管如此,對(duì)抗原的抗原性還是有損害,所以必須進(jìn)行抗原修復(fù)。

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