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細(xì)胞培養(yǎng):細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢怎么辦?點(diǎn)擊次數(shù):4458 更新時(shí)間:2017-06-16

在細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)中,難免會(huì)遇到這樣那樣的問(wèn)題,比如細(xì)胞不貼壁、HP值變化迅速、細(xì)胞凋亡、等等。

細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢

1.培養(yǎng)基或血清改變:比較不同培養(yǎng)基配方中葡萄糖、氨基酸及其他成分有無(wú)差異;通過(guò)生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)比較新老批次血清有無(wú)差異;增大細(xì)胞初始接種密度;使細(xì)胞逐步適應(yīng)新的培養(yǎng)基。

2.必需生長(zhǎng)促進(jìn)成分(如L-谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子)耗竭、缺乏或分解:去除原培養(yǎng)基,加入新鮮培養(yǎng)基;向培養(yǎng)基中添加生長(zhǎng)促進(jìn)成分(如L-谷氨酰胺)。

3.輕度細(xì)菌或真菌污染:在不添加抗生素的條件下進(jìn)行培養(yǎng),如細(xì)胞被污染,滅菌處理后丟棄。

4.時(shí)間存儲(chǔ)不當(dāng):血清應(yīng)于-5℃至-20℃下儲(chǔ)存;培養(yǎng)基應(yīng)于2℃~8℃下避光儲(chǔ)存;盡量減少血清和培養(yǎng)基見(jiàn)光時(shí)間。

5.細(xì)胞初始接種密度低:增大活細(xì)胞接種密度。

6.細(xì)胞衰老、老化:將老化細(xì)胞丟棄,取用代數(shù)較少的細(xì)胞。

7.支原體污染:隔離細(xì)胞,檢測(cè)是否感染支原體;清洗通風(fēng)廚和培養(yǎng)箱,如細(xì)胞被污染,滅菌處理后丟棄。

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