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重組細(xì)胞因子有何要求點(diǎn)擊次數(shù):1274 更新時(shí)間:2017-11-22

   細(xì)胞因子由免疫細(xì)胞(如單核、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等)和某些非免疫細(xì)胞(內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等)經(jīng)刺激而合成、分泌的一類(lèi)具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì)。通過(guò)結(jié)合相應(yīng)受體調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和效應(yīng),調(diào)控免疫應(yīng)答。
  重組細(xì)胞因子要求:
  1. 真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過(guò)N末端氨基酸序列分析;必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測(cè)其真實(shí)性。
  2. 純度:應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。
  3. 生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外(in vitro)或體內(nèi)(in vivo)活性檢測(cè)。
  4. 蛋白含量:通過(guò)紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測(cè);必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。
  5. 內(nèi)毒素:kinetic LAL法檢測(cè)內(nèi)毒素。
  6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過(guò)濾除菌處理。
  重組細(xì)胞因子的狀態(tài):
  市場(chǎng)上主流的重組蛋白產(chǎn)品,多在不含載體蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的條件下,以低鹽的形式做凍干處理,因此微量(多以微克計(jì)量)的細(xì)胞因子在凍干過(guò)程中會(huì)沉積于管內(nèi),形成很薄或不可見(jiàn)的蛋白層,所以建議在收到試劑后,務(wù)必于開(kāi)蓋前先離心20-30秒,使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于凍干館的底部(此時(shí)能否見(jiàn)到白色沉淀均屬正?,F(xiàn)象)。
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